内皮细胞迁移机制的实验研究
张静静 高华 刘廷 董晓光 王宜强
作者单位：250021 济南，山东省眼科医院 济南市经四路372号
通讯作者：董晓光，山东省眼科研究所
【摘要】目的：观察内皮细胞迁移过程中细胞表型及细胞转型调控因子Twist的表达变化，探讨内皮细胞发生迁移的机理。方法：体外培养EA.hy 926，细胞达到完全融合后用100μl微量移液头在24孔板内垂直划痕，宽度控制在500μm左右，继续培养8h、24h、72h。观察划痕内细胞形态变化，免疫荧光检测VE-钙黏蛋白、波形蛋白和细胞转型调控因子Twist表达变化。RT-PCR检测VE-钙黏蛋白、波形蛋白和Twist表达变化。结果：8h迁移到划痕内细胞呈梭形，可见伪足，且波形蛋白和Twist表达增加，VE-钙黏蛋白表达减少,划痕外细胞则呈铺路石样，仅表达VE-钙黏蛋白，24h划痕内的梭形细胞增加，72h划痕内的细胞完全融合呈铺路石样，又仅表达VE-钙黏蛋白。结论：划痕实验说明内皮细胞发生了间质转化，转化为间质细胞，从而获得了迁移的能力，并且这个过程是可逆的，同时，细胞转型调控因子Twist表达增加。内皮间质转化参与新生血管的形成，并且可能与细胞转型调控因子Twist的表达上调有关。
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